Reklam
Sağlık Ve Spor Haberleri

SARS-CoV-2 proteinleri otofajiyi manipüle ediyor

reklam
Reklam


Devam eden koronavirüs pandemisi (COVID-19) dünya çapında 4,1 milyondan fazla can aldı. Bu pandemiye yeni bir tek sarmallı RNA virüsü, yani ilk olarak 2019’da Çin’in Vuhan kentinde bildirilen şiddetli akut solunum sendromu koronavirüs 2 (SARS-CoV-2) neden olur. Bu virüsün hızlı yayılması, yüksek bulaşıcılığına ve örneğin otofaji gibi konakçı bağışıklık tepkilerinden kaçma ve bunlara karşı koyma yeteneğine bağlanır.

Otofaji nedir?

otofaji Konağın antiviral savunmasında hayati bir rol oynayan evrimsel olarak eski bir oto-sindirim sistemidir. Lizozomal bozulma için bir virüsü veya viral bileşenleri hedefler. Birkaç virüs, otofaji ile lizozoma bağlı bozunmadan kaçınmak için araçlar geliştirir. Bu virüsler bazen, viral replikasyon, membran kaçakçılığı ve füzyon süreçleri sırasında hiçbir inhibisyona rastlanmayacak şekilde otofajik makineyi manipüle etmek için gelişir.

reklam
Çalışma: SARS-CoV-2 proteinleri tarafından otofajinin manipülasyonu.  İmaj Kredisi: Kateryna Kon / Shutterstock

SARS-CoV-2, insanlarda otofajik akışı azaltır

Önceki araştırmalar, insan hücrelerinin SARS-CoV-2 ile enfeksiyonunun otofajik akışı azalttığını ortaya çıkarmıştı. Bu, iki belirteç, yani işlenmiş LC3B ve LC3B-II formunun artan varlığı ve bir SQSTM1 birikimi incelenerek değerlendirilebilir. In vitro çalışmalar, virüsün rapamisin kullanılarak otofajinin başlatılmasından büyük ölçüde etkilenmediğini, ancak interferonlar yoluyla doğuştan gelen bağışıklık uyarımına duyarlı kaldığını ortaya koydu. Bu deney, SARS-CoV-2’nin otofajinin antiviral işlevlerinden etkili bir şekilde kaçabildiğini gösterdi.

reklam

SARS-CoV-2 tarafından otofajinin antiviral işlevlerinden kaçınmanın arkasındaki moleküler mekanizma

Dergide yayınlanan yeni bir araştırma otofaji SARS-CoV-2 proteinlerinin otofaji üzerindeki etkilerinin sistematik bir analizini detaylandırıyor. Bu çalışmada araştırmacılar, bilinen 30 SARS-CoV-2 proteininden 29’unun otofaji üzerindeki etkisini analiz ettiler. Nsp15 varlığında LC3B-pozitif otofagozomların sayısında bir azalma buldular. Araştırmacılar bir Western Blot analizi yaptılar ve Nsp15’in MTOR eksenini etkilediğini buldular. Ek olarak, zarf (E), zar (M), ORF3a ve ORF7a gibi viral proteinlerin ifadesi, zarla ilişkili LC3B’nin sağlam bir birikimi ile sonuçlandı.

Bu çalışmanın yazarları, LC3B birikiminin aşağıdakilerle ilişkili olup olmadığını anlamak için proteinlerin otofagozom sayıları üzerindeki rolünü yeniden inceledi. tekrar otofajinin indüklenmesi veya daha doğrusu bir otofajik akış bloğunun neden olduğu. Otofajinin rapamisin tarafından aktivasyonu, E, M, ORF3a ve ORF7a üzerinde hiçbir etki göstermedi. Ayrıca bafilomisin A1 etkilerini maskeler. Sonuçlar, bu viral proteinlerin otofajik akışı önlediğini göstermektedir. Benzer şekilde, E, ORF3a, ORF7a ve Nsp15’in ifadesi, SQSTM1’in birikmesine neden olur.

Bu çalışmanın araştırmacıları, M proteininin LC3B işlemeyi tetiklemesine ve LC3B membran lokalizasyonunu artırmasına rağmen, SQSTM1 bozulmasını kısıtlamadığını bildirmiştir. Bu sonuç, bu viral proteinin klasik otofajiyi inhibe etmediğini gösterir. Çalışma ayrıca otofajide SARS-CoV-2 ORF3a, ORF7a, M ve Nsp15’in korunmuş bir dizi olduğunu buldu. Dizileri karşılaştırırken, en yakın benzerlik, yarasa koronavirüsü RaTG13 ve SARS-CoV-1’in korunmuş dizileriyle bulundu.

ORF3a ve ORF7’nin otofajik akıştaki rolü

Araştırmacılar, ORF3a ve ORF7a’nın otofajik akışı bloke ettiği moleküler mekanizmaları değerlendirmek için bir proteomik analiz gerçekleştirdi. Hem ORF3a hem de ORF7a’nın geç endozomal belirteçler ve trans-Golgi ağ belirteçleri ile aynı yerde olduğunu buldular. Ancak bunlar erken endozomal belirteçlerle lokalize olmazlar. pH’a duyarlı moleküler problar, otofagozomların olgunlaşmasını incelemek için kullanıldı ve mCherry-GFP-LC3B raportör sisteminin yardımıyla araştırmacılar, hem ORF3a hem de ORF7a’nın otofagozomların asitleşmesini önlediğini buldu. Bu çalışma ayrıca ORF7a’nın asidik lizozomların sayısını azalttığını, ORF3a’nın ise birikimlerini arttırdığını bildirmiştir.

Bu sonuç, ORF7a’nın lizozom asitliğini azalttığını ve otofagozomal bozulmayı desteklediğini, oysa ORF3a’nın lizozomlar ve otofagozomlar arasındaki füzyonu bloke ettiğini gösterir.

Mevcut çalışmanın bir başka heyecan verici sonucu, lizozomların ORF7a aracılı asitsizleştirilmesinin, bozulmayı önleyerek viryonların salınmasına yol açabilmesidir. Ek olarak viral E proteini, lizozomal yoldan SARS-CoV-2 viryon salınımına yardımcı olmak için otofagozomların yeniden yönlendirilmesinden sorumlu olabilir.

Sonuçlar

Mevcut çalışmanın yazarları, SARS-CoV-2 tarafından otofajiyi manipüle etmek için kullanılan proteinleri bildirmiştir. Ayrıca otofajikte ORF3a ve ORF7a’nın moleküler mekanizmalarını da vurgulamışlardır. Bu sonuçlar, SARS-CoV-2’nin patogenezinin ve otofaji indüksiyonundan kaçma mekanizmalarının anlaşılmasına yardımcı olur. Bu araştırma ayrıca E, M ve Nsp15’in otofajiyi nasıl modüle ettiğini anlamak için gelecekteki çalışmaların yolunu açmıştır.

.


news-medical.net

Source link

reklam
reklamm

Bir cevap yazın

E-posta hesabınız yayımlanmayacak. Gerekli alanlar * ile işaretlenmişlerdir

reklam
Başa dön tuşu

Reklam Engelleyici Algılandı

Lütfen Reklam Engelleyiciyi Kapatınız